胶原蛋白肽复合配方对去势大鼠骨质疏松的防

摘要目的:评价胶原蛋白肽、植物雌激素染料木素和大豆甙元、柠檬酸钙联合防治去势大鼠骨质疏松的作用。方法:50只平均体重g的三月龄SD雌性大鼠,随机分为5组,包括假手术组、去势对照组、雌激素组以及配方高剂量及低剂量组。给药12周,测定受试大鼠骨密度、Micro-CT以及骨生物力学等。结果:配方高剂量组与去势对照组相比股骨、股骨头以第四腰椎骨骨密度均有显著性的提高(P0。05),并且比单独应用雌二醇效果更加明显。通过Micro-CT测得给药后受试大鼠的骨微结构相比去势对照组在骨容积率、骨小梁数量及骨小梁厚度上均有改善。给药组股骨的最大载荷与去势对照组相比有升高的趋势。结论:高剂量的植物雌激素、胶原蛋白肽与柠檬酸钙联合应用能够改善卵巢去势大鼠的骨密度、骨微结构以及骨生物力学性质,对临床应用具有指导作用。关键词:骨质疏松;胶原蛋白肽;植物雌激素;更年期综合征1引言当女性进入中年,雌激素代谢便开始出现不平衡,体内雌激素的含量会急剧下降。给中年女性带来了一系列不适,甚至会有某些身体上的变化,例如,失眠、焦虑、抑郁、热潮红、肥胖、骨质疏松等[1]。对于这些患有更年期综合症的女性来说,雌激素替代治疗(ERT)可以补充雌激素和孕激素,使症状减轻或消失,预防骨质疏松和降低心血管疾病的发病率。不过美国食品药品管理局(FDA)建议,单独使用雌激素防治妇女更年期综合症及骨质疏松可能增加心肌梗死、脑卒中、浸润性乳腺癌、肺栓塞和深静脉血栓性静脉炎的风险[2,3]。

植物雌激素是植物里具有弱雌激素作用中的化合物,通过与甾体雌激素受体以低亲和度结合后而发挥弱的雌激素样效应[4]。它虽然被人们称为植物性雌激素,但其实它们本身不是激素。植物性雌激素的结构与女性体内的雌激素相似,可以起到模拟、干扰、双向调节内分泌水平等生理化作用,这给广大女性追求健康、远离烦恼带来了新的希望。

本研究主要采用胶原蛋白肽、植物雌激素染料木素和大豆甙元、柠檬酸钙作为主要成分,研究其对去势大鼠骨质疏松的防治效果。

2材料与试剂

2.1材料与试剂胶原蛋白肽购自东宝生物技术股份有限公司,染料木素及大豆甙元均购自陕西森弗生物技术有限公司,柠檬酸钙购自郑州众信化工产品有限公司,雌二醇购自北京蓝弋化工产品有限责任公司。2.2动物及饲养环境实验采用3月龄SPF/VAF级SD大鼠,体重g,购自北京大学医学部实验动物科学部,合格证号:SCXK(京)-。

3实验分组及方法

3.1复合配方将胶原蛋白肽、染料木素、大豆甙元、柠檬酸钙以10:1:1:5于干粉混料机中进行混合制备。

3.2实验分组

按照表1将50只SD大鼠随机分成5组,各10只,除假手术组外进行去势手术,手术后7天开始进行骨质疏松预防研究,实验时间12周。

3.3实验取材

受试大鼠于实验结束后断颈处死,取股骨及第四腰椎骨。

3.4测试方法

分别对受试SD大鼠的股骨、股骨头以及第四腰椎骨进行双能X射线骨密度测试,对股骨及第四腰椎骨进行Micro-CT扫描,对股骨进行生物力学测试。

4实验结果

4.1骨密度测试

双能X射线骨密度检查是诊断骨质疏松最常用的方法,分别对受试大鼠的股骨、股骨头、第四腰椎骨进行了骨密度测试,结果如表2所示。

去势对照组与假手术组相比,股骨、股骨头及第四腰椎的骨密度均显著下降(P0。05),说明后去势后由于受试大鼠的雌激素分泌减少,造成明显的骨质疏松。而雌激素治疗组与去势对照组相比,仅在股骨密度上有显著增加(P0。05),在股骨头和第四腰椎密度上无显著变化,说明雌激素治疗不能全面的提升去势大鼠的骨密度。配方的高剂量组与去势对照组相比,在三个测试部位均能显著提升骨密度(P0。05),其效果比雌激素治疗效果更加明显。4.2Micro-CT测试

根据骨密度测试结果,选取与各组平均骨密度最为接近的样本进行Micro-CT扫描,股骨结果如表3所示,第四腰椎骨结果如表4所示。

与去势对照组相比,受试动物给药后,在骨容积率、骨小梁数量、骨小梁厚度等显微结构上均有改善,并且高剂量组比低剂量组效果更好。股骨中皮质骨较多,而第四腰椎骨中主要是松质骨,其显微结构更加精细,骨小梁的数量更多,复合配方对松质骨的改善更加明显。4.3生物力学测试

应用三点弯曲法,对股骨进行生物力学强度测试,结果如表5所示。

实验结果显示,虽然复合配方有增大生物力学强度的趋势,但没有表现出显著性差异。其中假手术组与雌激素组与去势对照组相比也没有显著性,这或许是由于12周的实验时间还不足以造成骨生物力学的显著性差异。5讨论骨质疏松是一种以低骨量和骨组织微结构破坏为特征的骨代谢性疾病。染料木素、大豆甙元、胶原蛋白肽以及柠檬酸钙联合作用在提高骨量,改善骨显微结构的方面均有明显的作用,并且比常见的雌激素治疗的效果更显著。啮齿类动物绝经后骨质疏松症可能是一种以器官特异性免疫紊乱为特征,由雌激素缺乏而触发的免疫机制参与的一种炎症性疾病[5]。复合配方采用的染料木素及大豆甙元据研究报道能够安全的可靠的在细胞、动物体以及临床层面表现出雌激素活性,改善更年期骨质疏松[6],热潮红等不适症状[7],同时避免了传统雌激素替代疗法所带来的癌症及心脑。血管疾病的风险。胶原蛋白肽可促进骨的形成,增强低钙水平下的骨胶原结构,从而提高了骨强度,达到了预防骨质疏松症的作用,并且胶原蛋白肽也是皮肤的重要组成成分,在防治骨质疏松的同时对改善肌肤问题,延缓衰老,有非常好的功效[8,9]。此复合配方在防治妇女更年期综合症,尤其是治疗由更年期引起的骨质疏松提出了新的方法,具有广阔的应用前景。

参考文献

[1]辛晓玲,李玉泽,汪江碧.啤酒花提取物对卵巢去势大鼠雌激素水平的影响[J].实用医学杂志,,26(3):~.

[2]RossouwJ.E.,AndersonG.L.,PrenticeR.L.,etal.Risksandbenefitsofestrogenplusprogestininhealthypostmenopausalwomen:principalresultsfromtheWomen’sHealthInitiativerandomizedcontrolledtrial[J].JAMA,,:~.

[3]HarisR.B.,LawsA.,ReddyV.M.,etal.ArewomenusingpostmenopausalestrogensA


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