WesternBolt实验样品出现胶状

WesternBolt实验样品出现胶状物的处理办法

-样品制备经验分享-

在WesternBolt实验中,我们在制备样品,在加入细胞裂解液时,细胞裂解往往会有胶状物出现。这种胶状物一般认为是核酸复合物。如果不处理会影响后续的上样以及最终的实验结果。

避免这种胶装物质有几种方法可供参考:

1、裂解后的样品rpm离心10min后,取上清,再进行后续实验;

缺点是增加了样品制备的时间;

2、增加细胞裂解液使用的量or降低细胞密度;

缺点是裂解液用太多,蛋白酶抑制剂也要用很多,众所周知,这玩意比较贵,用多了可能会被师兄说;

3、加入裂解液后,超声处理;

缺点是超声处理对仪器要求特别高;

4、在配置裂解液时,不仅仅加入蛋白酶抑制剂,也加入核酸酶;

核酸酶会将核酸复合也就是裂解后的胶状物质裂解,使样品澄清,上样过程顺滑,提高实验结果的稳定性,比较推荐。

LonesomeMei




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