明胶-海藻酸盐复合微球与凝胶修复软骨损伤
背景：软骨损伤的微创治疗对于微载体的要求较高，需要其有较高的细胞相容性、较强的细胞黏附力、较好的力学性能与低免疫原性。同时，临床使用条件相比实验室更加苛刻，在微创或注射使用微载体时液态微载体要明显优于固态微载体。
目的：制备一种全新的高分子有机微载体，以用于修复软骨缺损。
方法：通过明胶与液体石蜡(W/O)混合搅拌的化学乳化法制备浓度为6%的明胶微球，冻干后用无水乙醇处理固定，再使用紫外交联法固定，电镜观察微球形态。配置浓度为7%的海藻酸钠凝胶，与明胶微球混合孵育2h，制备明胶-海藻酸盐复合凝胶。将脂肪间充质干细胞悬液滴入明胶-海藻酸盐复合凝胶中孵育24h，滴入5%CaCl2溶液中充分交联，制备含细胞明胶-海藻酸盐复合微球。采用CCK-8法检测无细胞明胶-海藻酸盐复合微球浸提液的细胞毒性；利用死活染色观察含细胞明胶-海藻酸盐复合微球的细胞活性；将约1mL明胶-海藻酸盐复合凝胶吸入10mL针管进行注射，对未注射与注射1，3次的凝胶进行光镜观察。
结果与结论：①扫描电镜下可见，明胶微球孔隙相对均一且表面有层次感，微球粒径大多分布在-μm之间；②死活染色显示，培养24h含细胞明胶-海藻酸盐复合微球中的细胞生长良好，携带细胞数量多且分布均匀，培养1，3，7d后的细胞活性均在90%以上；③CCK-8检测显示，无细胞明胶-海藻酸盐复合微球浸提液无明显的细胞毒性；④与未注射时相比，注射1，3次后明胶-海藻酸盐复合凝胶中的明胶微球形态无变化，显示明胶-海藻酸盐复合凝胶体力学性能良好；⑤结果表明，联合使用含细胞明胶-海藻酸盐复合微球及含细胞明胶-海藻酸盐复合凝胶可使凝胶发挥组织胶的作用，利于材料紧贴目标区域。
关键词:明胶,海藻酸盐,复合微球,复合凝胶,高分子有机材料,化学乳化法,细胞相容性,光交联,软骨
引用本文：蒋浩然,高健明,林万程,李婷,李获,王鹏,冯靖,孟昊业,彭江,丁立祥.明胶-海藻酸盐复合微球与凝胶修复软骨损伤[J].中国组织工程研究,,26(28):-.
阅读全文：