知无不研一文读懂RNApulldow

RNA与蛋白质的相互作用是细胞生理过程得以实现的决定性因素之一。近年来,随着技术的改进和新方法的建立,RNA和蛋白质的相互作用研究取得了长足进步。目前科研人员已经鉴定了较多RNA上的蛋白质结合位点,也发现了许多蛋白质中的RNA结合结构域,并对它们的结构特征进行了比较详细的研究。这些为最终探明RNA和蛋白质相互作用的分子机制,从而从本质上认识相关的细胞生理过程打下了坚实的基础。RNApull-down作为研究RNA与蛋白互作的核心技术,已成为研究焦点。RNApulldown是使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过WB实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用,或者结合MS筛选RNA结合的未知蛋白。(图片来源于


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